微生物培養(yǎng)基配制與滅菌實操：避免污染的關(guān)鍵技巧

?無菌操作與儲存管理：阻斷后續(xù)污染途徑

1. ?倒平板的無菌操作要點

1. 預(yù)熱與消毒：將滅菌后的固體培養(yǎng)基置于 50℃水浴鍋中保溫，防止提前凝固；超凈工作臺紫外消毒 30min 后通風(fēng)，實驗人員穿戴無菌服、口罩、手套，雙手用 75% 酒精消毒。

2. 火焰滅菌操作：在酒精燈火焰旁開啟錐形瓶棉塞，瓶口快速通過火焰滅菌，防止瓶口雜菌落入。

3. 倒平板規(guī)范：每皿倒入 15–20mL 培養(yǎng)基，輕輕晃動培養(yǎng)皿使培養(yǎng)基均勻分布，避免產(chǎn)生氣泡；若出現(xiàn)氣泡，可用無菌接種環(huán)輕輕挑破。

4. 凝固與保存：待培養(yǎng)基完全凝固后，將培養(yǎng)皿倒置存放（防止冷凝水滴落污染培養(yǎng)基表面），標記培養(yǎng)基名稱、配制日期，置于 4℃冰箱保存，保存時間不超過 7 天。

2. ?培養(yǎng)基儲存的注意事項

• 儲存條件：固體培養(yǎng)基平板倒置存放于 4℃冰箱，避免陽光直射；液體培養(yǎng)基密封后冷藏，防止揮發(fā)和污染。

• 有效期管理：普通培養(yǎng)基冷藏保存不超過 1 周；含抗生素、血清等特殊成分的培養(yǎng)基需現(xiàn)配現(xiàn)用，最長不超過 3 天。

• 污染判定：儲存過程中若培養(yǎng)基出現(xiàn)渾濁、異味、菌落或顏色變化，立即丟棄，嚴禁使用。